Cara Uji Coliform menggunakan Colilert

PRINSIP ANALISIS

1. Coliform terdiri atas semua bakteri aerobik, fakultatif aerobik, gram negatif tidak
    membentuk spora, bakteri berbentuk batang yang mempermentasikan laktosa dengan
    pembentukan gas dan asam dalam waktu 48 jam pada suhu 35 oC. Fecal Coliform adalah
    coliform yang ditemukan pada kotoran hewan berdarah panas dan dibedakan dari coliform
    yang berasal dari sumber lain dengan kemampuannya untuk menghasilkan gas dalam waktu
    24 jam pada suhu 44.5 oC dalam medium EC.

2. Untuk teknik fermentasi multi-tabung, hasil-hasil pemeriksaan tabung pengulangan dan
    pengenceran dilaporkan dengan istilah MPN (Most Probable Number) atau jumlah yang paling
    mungkin. Angka ini didasarkan pada rumus probabilitas tertentu , dan merupakan perkiraan
    dari rata-rata densitas coliform di dalam sampel.


INTERFERENSI

Pengukuran mikrobiologis memerlukan penanganan yang benar-benar aseptik (bersih), sehingga tidak terjadi kontaminasi pada sampel, tempat kerja yang kotor dan berdebu akan mengakibatkan kontaminasi pada sample.


PERALATAN

1. Quanty-Tray/2000 (100 Sterile Quanty-Tray/2000) Prt No. 98-21675-00

2. Quanty-Tray Sealer

3. Long Wave UV panjang gelombang 365 nm

4. Inkubator 37 0C

5. Tabel Perhitungan Bakteri

6. Coliler Part No. : 98-20705-00



PEREAKSI

Coliler Part No. : 98-20705-00


PROSEDUR

1. Panaskan Quanty-Tray Sealer hingga tanda ready menyala (Lampu Indikator “READY”
    menyala)

2. Siapkan 100 mL larutan blank dan sampel

3. Buka ampul Colilert dan tuangkan isinya ke dalam sampel.

4. Kocok dengan kuat, pastikan semua pereaksi Colilert sudah larut sempurna.

5. Tuangkan blank atau sampel ke dalam Quanty-Tray/2000, ikuti petunjuk manufaktur di bawah


6. Setiap lubang dalam quanty-tray harus terisi penuh/tidak ada gelembung udara, dengan cara
    membalikkan posisi quanty-tray, kemudian gunakan telunjuk jari untuk meyakinkan bahwa
    setiap lubang tidak terdapat gelembung udara

7. Masukkan quanty-tray ke dalam quanty tray sealer dengan cara menekan tombol “RUN”, lalu
    simpan quanty-tray pada tempatnya, kemudian tekan tombol “SEAL”.

8. Setelah quanty-tray keluar dari sealer, pindahkan ke dalam inkubator pada suhu 37 0C selama
    24 jam.

9. Setelah 24 jam amati perubahan warna yang terjadi, apabila bening/tak berubah warna,
    berarti T-coliform dan E-colinya tidak ada atau nol.

10. Apabila terjadi perubahan warna menjadi kuning, maka perhitungan jumlah bakteri adalah
      sebagai berikut:

    a) Total Coliform
        Hitung jumlah lubang besar yang berwarna kuning, begitu pula jumlah lubang kecil yang
        berwarna kuning. Jumlah total coliform dapat dilihat dalam tabel.

    b) E-Coli
        Nyalakan Lampu Long Wave UV panjang gelombang 365 nm. Masukkan quanty-tray yang
        berwarna kuning, amati apakah warna kuning tersebut berfluoresensi atau tidak. Jika tidak
        berfluoresensi, berarti tidak ada E-coli. Jika berfluoresensi, hitung lubang besar yang
        berfluoresensi, begitu juga dengan lubang kecil yang berfluoresensi. Jumlah E-coli dapat
        dilihat dalam tabel.


PERHITUNGAN

Dengan menggunakan tabel perhitungan bakteri


VIDEO



REFERENSI

Quanti-Tray 2000 Procedure
Quanti-Tray Sealer Procedure